三氯化鋁在水體中腸道病毒濃縮中的應(yīng)用
腸道病毒(Enterovirus,EV)是影響人體健康的重要病原微生物之一,水體中的腸道病毒必須通過有效的濃縮才能提高檢出率。本法依據(jù)絮凝原理，采用三氯化鋁和氯化鈉聯(lián)合絮凝，有利于水中腸道病毒的濃縮，方法操作簡便，結(jié)果滿意。
１材料與方法
1.1絮凝與濃縮
取含Polil病毒水樣1L，加入0.05M三氯化鋁溶液10ml，10g氯化鈉充分混勻后，置入冰箱過夜。次日棄去上清液，沉淀物3000r/min離心20分鐘，離心后濃縮物加入PH11.4的甘氨酸EDTA緩沖液5ml，使絮凝塊溶解。然后調(diào)整PH至7.4，并加入抗菌素適量，最終體積約6.5ml。取含甲肝病毒水樣200ml，用上述方法絮凝濃縮，最終體積約1ml。
1.2病毒檢測
Polil病毒檢測，以濃縮物按10倍遞增稀釋，每個(gè)稀釋度接種4管BGM細(xì)胞，連續(xù)觀察細(xì)胞病變7天，以TCD50表示病毒滴度，并計(jì)算回收率。甲肝病毒檢測，以濃縮物接種FRhk4細(xì)胞，33℃21天，用免疫螢光法檢測存活。
1.3檢測樣品
采用脫氯自來水加入一定量的Polil病毒和天然海水加入一定量的甲肝病毒 作為檢測樣品。
2 結(jié)果與討論
含Polil病毒水樣經(jīng)絮凝濃縮后, 檢測結(jié)果的回收率為 83.74%～96.14%, 平均回收率為 92%, 見表 1。
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含甲肝病毒水樣經(jīng)絮凝濃縮后, 在培養(yǎng)一個(gè)月期間內(nèi), 定期檢查病毒存活情況, 同樣獲得滿意結(jié)果。
有報(bào)道國外曾采用氯化鋁濃縮自來水Polil 病毒, 回收率為 71%化鋁2氯化鈉絮凝濃縮法, 把回收率提高到92%。由于本法操作簡便, 不需特殊的試劑和設(shè)備, 適合于基層實(shí)驗(yàn)室使用。
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